转染（transfection）
真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。
2转染类型
常用的细胞转染方法主要分为三类途径：物理介导（电穿孔法，基因枪法、显微注射法）、化学介导（脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物介导法）、生物介导（病*介导转染、原生质体转染）。
01物理介导?电穿孔法：短暂高强度脉冲，介导外源基因导入?基因枪法：粒子轰击法，氦气或氮气通过压缩，冲击细胞，将携带的外源基因轰入细胞内部?显微注射法：管尖极细（0.1至0.5μm）的玻璃微量注射针，将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中02化学介导?脂质体转染法：脂质体类似于细胞膜结构的化学物质，包裹外源DNA，通过膜融合，介导的胞吞作用?磷酸钙共沉淀法：Ca2+离子与DNA可形成复合物沉淀，加入细胞表面，可介导内吞作用进入?阳离子聚合物介导法：阳离子聚合物可与DNA的磷酸根通过静电作用结合形成复合物，介导外源基因进入细胞03生物介导?病*介导转染：通过病*为媒介，携带外源基因，感染细胞，介导外源基因插入至基因组的方法（慢病*，腺病*，灭活仙台病*）?原生质体转染：以原生质体为受体细胞,将目的基因导入受体细胞,使之表达3不同转染类型的优劣势分析
因此，瞬转有化学介质的*性影响，病*转染，有潜在的安全影响，有致瘤的风险，选取一种无*，安全的转染方法是当前也是以后必然的一种趋势和方向，电转染方法应运而生。4电转染原理及其应用
01电转染是通过短暂的高强度电脉冲作用于细胞，当外加电场强度大于细胞膜穿孔的临界强度，细胞膜上就会出现一过性的、可逆的孔道，外源大分子如ＤＮＡ、蛋白或抗体等以弥散的方式通过这些孔道直接进入细胞内，或伴随孔道关闭时细胞膜结构重塑以吞饮的方式进入细胞内。02电转原理?细胞膜近似绝缘体，细胞附近电转液中电流扭曲；?在串联电路中电阻越大分到电压越大，细胞两端电压基本都落在两端细胞膜上只有一个细胞端面电转有效；?细胞质内分到电压很小，DNA电转进入细胞膜后马上停止，后续靠细胞本身机制慢速扩散；?细胞核两端电压及其微小，微小的电压又落在核膜上，核内部完全没有电压，电转没有基因*性。03电转染的应用电脉冲疗法具有广阔的前景，它是指在电脉冲的作用下，细胞膜的通透性发生改变，细胞产生可逆性或不可逆性电穿孔，利用这种穿孔，导入那些在正常情况下不易通过细胞膜的药物、疫苗、DNA、RNA及寡核苷酸等物质，或直接使肿瘤细胞发生不可逆性电穿孔而破裂死亡，从而达到治疗目的。
?电化学疗法：利用高强度的电脉冲引起细胞膜结构改变，使原本不易透过脂质双分子层膜的化疗药物易进入细胞内，将电脉冲与化疗药物相结合治疗肿瘤，可以增强化疗药物对肿瘤细胞的*性作用，降低化疗药物的全身使用剂量，克服化疗耐药性和肿瘤治疗后再生的问题；
?电转基因疗法：将电脉冲和基因治疗结合起来，利用电脉冲所致的可逆性穿孔导入DNA或RNA疫苗，通过DNA或RNA的表达抑制肿瘤的发展，亦称电基因疗法；?不可逆性电穿孔：随着电脉冲剂量的增加，细胞膜出现不可恢复的破裂即不可逆性电击穿（irreversibleelectroporation，IREP）而导致细胞死亡?细胞内电处理疗法；?细胞电融合技术的应用；?蛋白分子电嵌入细胞膜的研究。5电转解决的问题
01适用于难转染细胞类型干细胞、原代细胞、神经细胞、不分化细胞、部分难转染肿瘤细胞。
02缩短实验周期电转染方法相较于脂质体和病*转染，大大缩短转染周期，可快速的获取得到实验结果，加快科研进程。03操作简单电转染方法操作简单，易上手。04生物安全性更高对于科研与临床结合试验来说，脂质体转染有化学*性，对细胞影响较大，死亡量较高，生物病*型感染，有潜在的致瘤风险，而物理的电转染法，既可保证转染效率，又可保证生物安全性，成为新一代机具潜力的转染技术应用。05多体系转染现阶段研究，多以单基因，寻找明星分子或筛选（测序）获取得到研究的靶标分子，针对单个因素，研究生理生化及其转化转归，作用机制，代谢路径，作用方式等方面，而电转不局限于单个基因的研究，可多体系，多质粒，多功能基因组层次筛选与转染，提高科研层次，开拓科研广度，加大科研深度。06文章相关研究论述?功能基因组筛选：基因编辑-CRISPR-READI；?外泌体相关研究：电转提高外泌体的稳定性；?双荧光素酶研究：小鼠视网膜体外电转与双荧光素酶实验联合评估启动子活性实验
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